糖化血红蛋白检测方法

糖化血红蛋白检测方法很多，常用的有微柱法离子交换层析、亲和层析、高压液相、免疫凝集、离子捕获法、电泳法等

离子交换层析是指分手工和仪器两种。手工微柱有Bio-Rad和西班牙BIO SYSYEMS等多家公司产品，手工微柱操作受到人工因互影响，可能会洗脱不完全或过度洗脱，并受外界环境温度的影响，而某些红蛋白如HbF异常增加时，也会与糖化血红蛋白同时洗脱肉而使结果产生偏差。相应的仪器以英国DrewSCIENTIFIC公司DS5糖化血红蛋白仪为例(Bio-Rad公司DIASAT亦为同一产品)，采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱胎技术可分离血红蛋白的变异体与亚型，除可测定糖化血红蛋白外，还可同时检测出HbS与HbC的存在与否，在计算糖化血红蛋白值时扣除变异体产生和影响，从而使结果更为准确、可靠，CV值小于2。同时该仪器配有专门的稀释溶血器，可直接进行全血操作，5分钟即可报告结果，并储存样品的检测结果，层析柱价格也较为低廉。适合于较多标本的检测。更大型的仪器有Drew SCIENTIFIC公司的Hb-Gold，除可测定糖化血红蛋白外，还可分离检测血红蛋白的600多种子变异体和亚型，用于地中海贫血等疾病的诊断。

亲和层析是指目前糖化血红蛋白检测的新方法，该方法特异性强，不受异常血畿蛋白的干扰。英国DREWSCIENTIFIC公司的DS1糖化血红蛋白分析仪日前刚刚获得美国仪器药品管理署(FDA)的认可获准上市，作为目前世界的快速床边糖化血红蛋白仪，它彩硼酸亲和层析法，只需10ul全血即可在4分钟内快速分离检测糖果化血红蛋白，为临床提供即时的化验结果，从而使医生在患者就诊的时间明确诊断并制定相应的治疗方案，特别适合于临床科室使用，尤其对小儿患者而言更有优势。其检测结果也完全达到并超过临床要求，CV值5以内。

高压液相方法是指可全分离测定糖化血红蛋白及血蛋白的变异体和亚型，优点是检测速度快，精度高，CV值小于1。是目前世界上公认的糖化血红蛋白检测的金标准。仪器保养简单，价格相对低廉，操纵性能强。附：Tosoh公司是参加美国DCCT实验的原始机构之一，在糖化血红蛋白领域具有一定权威性。

免疫凝集法的原理是糖化血红蛋白与相应的单抗结合进而发生凝集反应，通过测定吸光度来表示凝集量，可用于全生化分析仪上进行测定。专用的仪器也有Bayer的DCA-Vantage，要求对样品成批试验。每次试验均应使用一个新试剂盒，操作前应注意混匀试剂。指出的是免疫凝集法测定糖化血红蛋白，度较差，CV值一般大小6。